Kits MIDI / MAXI Plásmido de Ion Rápido

Utilizan columnas de resina de intercambio iónico preempaquetadas para purificar el ADN plasmídico o cósmido de cultivos bacterianos 


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Descripción

Kits MIDI / MAXI Plásmido de Ion Rápido 

Utilizan columnas de resina de intercambio iónico preempaquetadas para purificar el ADN plasmídico o cósmido de cultivos bacterianos 

El método modificado de lisis alcalina y el tratamiento con RNasa se utilizan para crear lisado depurado con contaminantes mínimos de ADN y ARN genómico. Usando un procedimiento de flujo por gravedad, el ADN plasmídico en lisado crudo se ha unido a la columna. Los contaminantes se pueden lavar con un buffer de lavado. Finalmente, el ADN purificado se eluye con un buffer con alto contenido de sal y luego se precipita con isopropanol para la desalación. Todo el procedimiento se puede completar en menos de dos horas. El ADN plasmídico purificado es adecuado para transfección, reacciones de secuenciación, PCR y transcripción in vitro. 

Kits MIDI 

  • Tamaño de muestra: 50 ml de plásmido de alta copia / 100 ml de plásmido de baja copia 
  • Operación: columna de flujo de gravedad 
  • Rendimiento expectante: 200 µg de ADN plasmídico 
  • Tiempo de operación: 120 minutos o menos 

Kits MAXI 

  • Tamaño de muestra: 100 ml de plásmido de alta copia / 250 ml de plásmido de baja copia 
  • Operación: columna de flujo de gravedad 
  • Rendimiento expectante: 500 µg a 1 mg de ADN plasmídico 
  • Tiempo de operación: 120 minutos o menos 

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Catálogo  Producto Presentación 
IB47111 Kit Fast-Ion Midi Plasmid 25 preparaciones
IB47112  Kit Fast-Ion Midi Plasmid (sin endotoxina) 2 preparaciones (muestra) 
IB47113  Kit Fast-Ion Midi Plasmid (sin endotoxina)  25 preparaciones 
IB47120 Kit Fast-Ion Maxi Plasmid  2 preparaciones (muestra) 
IB47121 Kit Fast-Ion Maxi Plasmid  10 preparaciones
IB47122 Kit Fast-Ion Maxi Plasmid  25 preparaciones
IB47123  Kit Fast-Ion Maxi Plasmid (sin endotoxinas)  2 preparaciones (muestra) 
IB47124  Kit Fast-Ion Maxi Plasmid (sin endotoxinas)  10 preparaciones
IB47125  Kit Fast-Ion Maxi Plasmid (sin endotoxinas)  25 preparaciones
    Productos de reemplazo  
IB47165  Buffer PM1  25 ml 
IB47166  Buffer PM2  25 ml 
IB47167  Buffer PM3  25 ml 
IB47115  Columnas de plásmido Midi de repuesto  Paquete con 10 
IB47116  Columnas de plásmido Midi de repuesto  Paquete con 25 
IB47126  Columnas de plásmido Maxi de repuesto  Paquete con 10 
IB47127 
 Columnas de plásmido Maxi de repuesto  Paquete con 25 

 

Información técnica

  • La calidad del kit Midi Fast Ion Plasmid se prueba lote a lote aislando el ADN plasmídico de un?cultivo de?E. coli?(DH5?)?nocturno de 50 ml?, que contiene pBluescript (A600> 2U / ml).?Más de 120 µg de ADN plasmídico se cuantifica con un espectrofotómetro.?El plásmido purificado (1 µg) se usa en la digestión con EcoRI y se verifica por electroforesis.
  • La calidad de los kits Fast-Ion Maxi se prueba lote por lote aislando ADN plasmídico de un?cultivo de?E. coli?(DH5?)?nocturno de 100 ml?, que contiene pBluescript (A600> 2U / ml).?Se cuantifican más de 400 µg de ADN plasmídico con un espectrofotómetro.?El plásmido purificado (1 µg) se usa en la digestión con EcoRI y se verifica por electroforesis.
Especificaciones  Midi Fast Ion Plasmid  Maxi Fast-Ion Plasmid  Maxi Fast-Ion Plasmid(sin endotoxina) 
? ?Formato  Anión – Intercambio  Anión – Intercambio  Anión – Intercambio 
? ?Operación  Flujo gravitacional  Flujo gravitacional  Flujo gravitacional 
? ?Capacidad de encuadernación  800 ug  1.5 mg  1.5 mg 
? ?Nivel de endotoxina  –  –  <0,10 UE / ug 
? ?Concentración de muestra  50-300 ml  200-1600 ml  200-1600 ml 
? ?Tipo de muestra  –  células bacterianas cultivadas (copia alta = 200-800 ml, copia baja = 500-1600 ml)  células bacterianas cultivadas (copia alta = 200-800 ml, copia baja = 500-1600 ml) 
? ?Tamaño del fragmento  1-20 kb  1-20 kb  1-20 kb 
? ?Rendimiento típico  200-800 ug  1-1.5 mg  1-1.5 mg 
? ?Volumen de elución  500 ul– 2 ml  500 ul– 2 ml  500 µl- 2 ml 
? ?Tiempo de operación  <120 minutos  <180 minutos  <180 minutos 

? 

¿Este kit viene con un émbolo?? 

Nuestro kit no usa un émbolo.?El Maxi Plasmid utiliza flujo por gravedad para garantizar que no se produzca taponamiento y evitar la pérdida de la muestra. 

¿Cómo puedo mejorar el rendimiento de los kits de plásmidos cuando tengo poco ADN copiado?? 

Para mejorar el rendimiento del ADN, aumente el volumen de cultivo bacteriano a 5 ml, esto debería funcionar. 

¿Cuáles son los nuevos volúmenes y rendimientos iniciales?? 

El protocolo ha sido revisado como tal;?Los kits maxi plasmid producen hasta 1,5 mg de ADN plasmídico de grado de transfección a partir de 400 ml de células bacterianas cultivadas. 

¿Cuál es el nivel de endotoxina del ADN eluido en el kit Maxi Fast-Ion Plasmid?? 

El nivel de endotoxina es <0.1 EU / µg de ADN.?Este nivel se determinó mediante pruebas LAL. 

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